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【微生物菌种培养设备生产厂家】
1.摇瓶培养的工艺流程 制备培养基一分装一灭菌一冷却一接种一摇床培养一一级液体菌种一二级液体菌种。
2.摇瓶培养要点
(1)培养基的配制 按配方称好各种成分,装入容器中,加水溶解后,分装入三角瓶中,一般250~300mL三角瓶装50mL培养液,500mL三角瓶装100mL培养液,塞上棉塞,用报纸包扎;也可用8层纱布做成8cm×8cm的瓶塞封口,外面用牛皮纸封口。
(2)灭菌一般采用高压灭菌方法,灭菌要求121℃、30min。取出冷却到30℃左右,放人无菌室或接种箱内备用。
(3)接种 按无菌操作要求每瓶接入2~3cm2的斜面菌种一块,每支斜面菌种可接4~5瓶。接入的菌种稍带点培养基为好,能使其浮在培养基的表面,接种后用原塞瓶口的纱布展开后盖在瓶口,并用线绳扎牢。
(4)培养接种好的菌种瓶可置于摇床上培养,也可置于24~26℃恒温下静置培养48h后,待气生菌丝延伸到培养液中后再进行振荡培养。往复式摇床的振荡频率为80~120r/min,旋转式摇床的频率为150~220r/min,摇床培养3~4d即可。培养结束时,因菌种不同,培养液出现不同色泽,如平菇、金针菇的培养液呈浅黄色;香菇、猴头菇的培养液呈红棕色,并有菇香味;木耳的培养液呈褐色,黏稠有香甜味。培养液经检测,无杂菌污染,菌丝干重达10g/L,菌丝球直径在1~2mm时,方可用于生产或进一步扩大培养。
(5)二级液体菌种制作 二级液体菌种培养基的制作同一级液体菌种,培养容器要大些,可采用5000mL三角瓶,装量不超过3500mL。灭菌冷却后,将已经发酵好的一级液体菌种按5%~10%的比例接入5000mL三角瓶中,置摇床上培养,转速要适当慢些。经过一定时间的振荡培养,就可得到菌球均匀分布、发酵液清澈透明的液体菌种。
3.影响摇瓶培养的因素
(1)培养温度食用菌菌丝的增殖及次级代谢产物的产生都在各种酶的催化下进行,而酶的催化反应需要适宜的温度,多数食用菌的适温度在22~30℃范围内。如香菇为25~26℃,金针菇、平菇为22~25℃,灵芝为28~30℃,云芝为30~31℃,猴头菇为24~26℃。培养温度过低,菌丝生长缓慢;培养温度过高,菌丝球松散、稀疏、活力降低、质量变差。